E,8，悬浮微生物的检测E。8、1.悬浮微生物的采样装置有以下两类.1。采用无源采样装置。如培养皿，2。采用有源采样装置、如撞击采样器。离心采样器、过滤采样器，E,8。2 空气洁净环境中悬浮微生物的静态或空态检测前 应对各类表面进行擦拭消毒.但不得对室内空气进行熏蒸,喷洒之类的消毒.动态检测均不得对表面和空气进行消毒.E.8，3。沉降菌检测应符合下列要求 1，使用直径90mm.Φ90 的培养皿采样.当采用其他直径培养皿时 应使其总面积和Φ90皿总面积相当,2。培养皿中灌注胰蛋白酶大豆琼脂培养基.必须留样作阴性对照 3、培养皿表面应经适当消毒清洁处理后 布置在有代表性的地点和气流扰动极小的地点.在乱流洁净室内培养皿不应布置在送风口正下方.4。当用户没有特定要求时,培养皿应布置在地面及其以上0、8m之内的任意高度 5,每一间洁净室或每一个控制区应设1个阴性对照皿。6 动态监测时也可协商布点位置和高度、7,培养皿数应不少于微粒计数浓度的测点数.如工艺无特殊要求应大于等于表E 8、3中的最少培养皿数,另外各加1个对照皿、8.当延长沉降时间时。可按比例减少最少培养皿数，为防止脱水、最长沉降时间不宜超过1h、当所需沉降时间超过1h.可重叠多皿连续采样、除非经过验证,证明更长的沉降时间可以基本按比例增加菌落数.9，培养皿应从内向外布置 从外向内收皿。10.每布置完1个皿,皿盖只允许斜放在皿边上。对照皿盖挪开即盖上，11，布皿前和收皿后，均应用双层包装保护培养皿。以防污染，12，收皿后皿应倒置摆放 并应及时放入培养箱培养、在培养箱外时间不宜超过2h、如无专业标准规定.对于检测细菌总数。培养温度采用。35,37。培养时间为 24 48、h、对于检测真菌。培养温度.27。29.培养时间3d 13,布皿和收皿的检测人员必须穿无菌服 但不得穿大褂、头,手均不得裸露.裤管应塞在袜套内，并不得穿拖鞋,14、对培养后的皿上菌落计数时.应采用5 10倍放大镜查看.若有2个或更多的菌落重叠、可分辨时则以2个或多个菌落计数,15.当单皿菌落数太大受到质疑时，可按以下原则之一进行处理.1，作为坏点剔除、2，重测、如结果仍大。以两次平均值为准.如结果很小。可再重测、3、重测该处微粒浓度.参考此结果作出判断.所有上述处理方法均应记录在案,16，每皿平均菌落数取到小数点后1位，17，动态监测时每点叠放多个平皿或采用可自动切换的仪器 每点应采满4h以上 每皿可采30min.当只放1个皿时，可少于4h。但不可少于1h、E。8，4，浮游菌采样应符合下列要求.1 使用单级或多级撞击式采样器.离心采样器或过滤采样器，采样必须按所用仪器说明书的步骤进行，特别要注意检测之前对仪器消毒火菌.并对培养皿或培养基条做阴性对照 2，采样点数应不少于微粒计数浓度测点数，3,采样点应在离地0 8m高平面上均匀布置 或经委托方 用户、与检测方协商确定、乱流洁净室内不得在送风口正下方布点.静态或空态检测前对室内各种表面应作擦拭消毒、4,每点采样1次，如工艺无特殊要求 每次采样量应大于等于表E 8 4推荐的浮游菌最小采样量。每次采样时间不宜超过15min。不应超过30min，当洁净度很高、或预期含菌浓度可能很低时、采样量应大于最小采样量很多.以满足减少计数误差的要求,5,采样器应用支架固定 采样时检测人员应退出,手持离心式采样器除外。检测人员的穿戴同本附录E,8,3条第15款。必须手持采样器时 应将手臂伸直 站于下风向。6,采样后宜在2h之内将采样器中的培养皿或培养基条送入培养箱中培养、7。每点平均值取到小数点后1位、8，动态监测的测点位置，数量和高度由工艺并经协商确定.每间洁净室或每一个独立受控环境中各点总采样量,不分级别,均应大于1m3、每点可用多台采样器 9.单点菌落数太大时、应按附录E、8.3条第15款的原则处理，E、8、5。表面染菌密度检测应符合下列要求 1.对于洁净室内围护结构 设备等表面的微生物采样。应采用无菌棉拭子擦抹法。当表面很大，硬且平时。也可采用接触皿法 2.用规格板标定出面积为25cm2的区块、对于围护结构、每面结构不少于4块，对于设备.每件不少于2块 取样地点均协商确定、3，将无菌棉拭于含10mL稀释液试管中浸湿,于管壁上挤干后、对一区块擦抹采样。横竖往返8次 每一区块使用1根无菌棉拭 采样后 以无菌操作方式将棉拭采样端剪入原稀释液试管中、经电动混匀器震荡20s或在手掌振打200次.4 取含菌液体1。0mL，以琼脂灌注法接种平皿。每个样本接种2个平皿。于、35.37。培养箱中培养.24、48 h后计数.5,必须将本次检测所用的稀释液.棉拭子 培养基等留样作阴性比照，6,具体事项遵照卫生部.消毒技术规范 执行。7，对于适用接触皿采样的表面。以无菌操作方式。先将培养基注入硬质或软质Φ55平皿、使培养基表面高出培养皿周边 测试时，将培养皿倒过来，使培养基表面均匀牢固地按压住整个区域5s、不得有环形或线性的运动.8、对于围护结构，每面结构应用不少于4个培养皿按压,对于设备 每件用不少于2个培养皿按压，9，按压取样后的培养皿 应在2h之内 于,35.37 培养箱中培养,24，48、h后计数 10 菌数平均数取到小数点后1位,