E。8.悬浮微生物的检测E 8,1 悬浮微生物的采样装置有以下两类 1.采用无源采样装置、如培养皿 2。采用有源采样装置，如撞击采样器、离心采样器、过滤采样器、E、8。2，空气洁净环境中悬浮微生物的静态或空态检测前.应对各类表面进行擦拭消毒,但不得对室内空气进行熏蒸。喷洒之类的消毒 动态检测均不得对表面和空气进行消毒,E.8、3，沉降菌检测应符合下列要求。1，使用直径90mm、Φ90，的培养皿采样，当采用其他直径培养皿时 应使其总面积和Φ90皿总面积相当,2，培养皿中灌注胰蛋白酶大豆琼脂培养基.必须留样作阴性对照，3 培养皿表面应经适当消毒清洁处理后，布置在有代表性的地点和气流扰动极小的地点，在乱流洁净室内培养皿不应布置在送风口正下方，4,当用户没有特定要求时、培养皿应布置在地面及其以上0.8m之内的任意高度,5。每一间洁净室或每一个控制区应设1个阴性对照皿、6。动态监测时也可协商布点位置和高度，7.培养皿数应不少于微粒计数浓度的测点数。如工艺无特殊要求应大于等于表E.8，3中的最少培养皿数,另外各加1个对照皿 8,当延长沉降时间时。可按比例减少最少培养皿数,为防止脱水,最长沉降时间不宜超过1h,当所需沉降时间超过1h、可重叠多皿连续采样、除非经过验证，证明更长的沉降时间可以基本按比例增加菌落数、9。培养皿应从内向外布置，从外向内收皿，10。每布置完1个皿，皿盖只允许斜放在皿边上,对照皿盖挪开即盖上。11、布皿前和收皿后、均应用双层包装保护培养皿 以防污染,12,收皿后皿应倒置摆放.并应及时放入培养箱培养，在培养箱外时间不宜超过2h,如无专业标准规定。对于检测细菌总数,培养温度采用。35、37 培养时间为.24 48,h 对于检测真菌。培养温度。27。29，培养时间3d 13，布皿和收皿的检测人员必须穿无菌服、但不得穿大褂、头、手均不得裸露 裤管应塞在袜套内。并不得穿拖鞋.14 对培养后的皿上菌落计数时，应采用5 10倍放大镜查看，若有2个或更多的菌落重叠。可分辨时则以2个或多个菌落计数，15、当单皿菌落数太大受到质疑时，可按以下原则之一进行处理,1 作为坏点剔除.2 重测,如结果仍大、以两次平均值为准,如结果很小，可再重测 3.重测该处微粒浓度。参考此结果作出判断，所有上述处理方法均应记录在案，16，每皿平均菌落数取到小数点后1位,17。动态监测时每点叠放多个平皿或采用可自动切换的仪器、每点应采满4h以上 每皿可采30min 当只放1个皿时，可少于4h。但不可少于1h。E。8.4,浮游菌采样应符合下列要求，1，使用单级或多级撞击式采样器、离心采样器或过滤采样器，采样必须按所用仪器说明书的步骤进行。特别要注意检测之前对仪器消毒火菌、并对培养皿或培养基条做阴性对照,2,采样点数应不少于微粒计数浓度测点数、3 采样点应在离地0。8m高平面上均匀布置.或经委托方，用户，与检测方协商确定,乱流洁净室内不得在送风口正下方布点。静态或空态检测前对室内各种表面应作擦拭消毒。4、每点采样1次,如工艺无特殊要求、每次采样量应大于等于表E 8。4推荐的浮游菌最小采样量，每次采样时间不宜超过15min。不应超过30min.当洁净度很高、或预期含菌浓度可能很低时。采样量应大于最小采样量很多.以满足减少计数误差的要求，5。采样器应用支架固定、采样时检测人员应退出.手持离心式采样器除外,检测人员的穿戴同本附录E、8.3条第15款，必须手持采样器时。应将手臂伸直,站于下风向、6 采样后宜在2h之内将采样器中的培养皿或培养基条送入培养箱中培养,7。每点平均值取到小数点后1位、8.动态监测的测点位置 数量和高度由工艺并经协商确定.每间洁净室或每一个独立受控环境中各点总采样量。不分级别.均应大于1m3、每点可用多台采样器,9 单点菌落数太大时.应按附录E。8、3条第15款的原则处理。E,8 5.表面染菌密度检测应符合下列要求、1.对于洁净室内围护结构，设备等表面的微生物采样，应采用无菌棉拭子擦抹法、当表面很大.硬且平时。也可采用接触皿法、2.用规格板标定出面积为25cm2的区块.对于围护结构、每面结构不少于4块、对于设备,每件不少于2块。取样地点均协商确定,3。将无菌棉拭于含10mL稀释液试管中浸湿.于管壁上挤干后、对一区块擦抹采样.横竖往返8次 每一区块使用1根无菌棉拭，采样后 以无菌操作方式将棉拭采样端剪入原稀释液试管中，经电动混匀器震荡20s或在手掌振打200次、4 取含菌液体1，0mL。以琼脂灌注法接种平皿,每个样本接种2个平皿，于。35.37，培养箱中培养，24、48，h后计数,5，必须将本次检测所用的稀释液、棉拭子，培养基等留样作阴性比照。6，具体事项遵照卫生部,消毒技术规范,执行、7、对于适用接触皿采样的表面 以无菌操作方式,先将培养基注入硬质或软质Φ55平皿、使培养基表面高出培养皿周边.测试时 将培养皿倒过来。使培养基表面均匀牢固地按压住整个区域5s.不得有环形或线性的运动.8,对于围护结构,每面结构应用不少于4个培养皿按压、对于设备。每件用不少于2个培养皿按压、9.按压取样后的培养皿，应在2h之内。于,35，37。培养箱中培养,24。48。h后计数。10、菌数平均数取到小数点后1位,