E。8.悬浮微生物的检测E，8,1。悬浮微生物的采样装置有以下两类 1。采用无源采样装置 如培养皿.2，采用有源采样装置，如撞击采样器，离心采样器，过滤采样器,E 8.2,空气洁净环境中悬浮微生物的静态或空态检测前，应对各类表面进行擦拭消毒 但不得对室内空气进行熏蒸 喷洒之类的消毒 动态检测均不得对表面和空气进行消毒.E.8 3。沉降菌检测应符合下列要求,1 使用直径90mm，Φ90。的培养皿采样.当采用其他直径培养皿时、应使其总面积和Φ90皿总面积相当。2 培养皿中灌注胰蛋白酶大豆琼脂培养基，必须留样作阴性对照.3。培养皿表面应经适当消毒清洁处理后。布置在有代表性的地点和气流扰动极小的地点。在乱流洁净室内培养皿不应布置在送风口正下方、4。当用户没有特定要求时.培养皿应布置在地面及其以上0,8m之内的任意高度。5 每一间洁净室或每一个控制区应设1个阴性对照皿。6，动态监测时也可协商布点位置和高度。7，培养皿数应不少于微粒计数浓度的测点数,如工艺无特殊要求应大于等于表E 8。3中的最少培养皿数、另外各加1个对照皿。8。当延长沉降时间时 可按比例减少最少培养皿数、为防止脱水 最长沉降时间不宜超过1h.当所需沉降时间超过1h 可重叠多皿连续采样,除非经过验证 证明更长的沉降时间可以基本按比例增加菌落数、9.培养皿应从内向外布置 从外向内收皿、10,每布置完1个皿，皿盖只允许斜放在皿边上 对照皿盖挪开即盖上.11.布皿前和收皿后。均应用双层包装保护培养皿、以防污染.12.收皿后皿应倒置摆放。并应及时放入培养箱培养、在培养箱外时间不宜超过2h。如无专业标准规定、对于检测细菌总数.培养温度采用 35、37，培养时间为，24，48。h 对于检测真菌,培养温度、27.29 培养时间3d。13、布皿和收皿的检测人员必须穿无菌服，但不得穿大褂.头，手均不得裸露、裤管应塞在袜套内.并不得穿拖鞋。14。对培养后的皿上菌落计数时。应采用5 10倍放大镜查看。若有2个或更多的菌落重叠 可分辨时则以2个或多个菌落计数，15、当单皿菌落数太大受到质疑时，可按以下原则之一进行处理。1.作为坏点剔除 2,重测，如结果仍大。以两次平均值为准 如结果很小,可再重测，3.重测该处微粒浓度，参考此结果作出判断,所有上述处理方法均应记录在案.16、每皿平均菌落数取到小数点后1位 17、动态监测时每点叠放多个平皿或采用可自动切换的仪器，每点应采满4h以上、每皿可采30min，当只放1个皿时，可少于4h，但不可少于1h E。8，4。浮游菌采样应符合下列要求 1.使用单级或多级撞击式采样器，离心采样器或过滤采样器 采样必须按所用仪器说明书的步骤进行，特别要注意检测之前对仪器消毒火菌，并对培养皿或培养基条做阴性对照,2、采样点数应不少于微粒计数浓度测点数 3、采样点应在离地0，8m高平面上均匀布置、或经委托方.用户，与检测方协商确定 乱流洁净室内不得在送风口正下方布点 静态或空态检测前对室内各种表面应作擦拭消毒，4。每点采样1次、如工艺无特殊要求，每次采样量应大于等于表E，8.4推荐的浮游菌最小采样量，每次采样时间不宜超过15min。不应超过30min。当洁净度很高 或预期含菌浓度可能很低时。采样量应大于最小采样量很多 以满足减少计数误差的要求。5,采样器应用支架固定，采样时检测人员应退出，手持离心式采样器除外，检测人员的穿戴同本附录E、8，3条第15款、必须手持采样器时.应将手臂伸直,站于下风向 6,采样后宜在2h之内将采样器中的培养皿或培养基条送入培养箱中培养。7，每点平均值取到小数点后1位、8,动态监测的测点位置.数量和高度由工艺并经协商确定 每间洁净室或每一个独立受控环境中各点总采样量 不分级别。均应大于1m3，每点可用多台采样器.9,单点菌落数太大时.应按附录E，8,3条第15款的原则处理 E。8,5。表面染菌密度检测应符合下列要求.1，对于洁净室内围护结构。设备等表面的微生物采样,应采用无菌棉拭子擦抹法，当表面很大 硬且平时，也可采用接触皿法,2。用规格板标定出面积为25cm2的区块、对于围护结构 每面结构不少于4块。对于设备。每件不少于2块。取样地点均协商确定。3.将无菌棉拭于含10mL稀释液试管中浸湿,于管壁上挤干后,对一区块擦抹采样 横竖往返8次，每一区块使用1根无菌棉拭、采样后，以无菌操作方式将棉拭采样端剪入原稀释液试管中,经电动混匀器震荡20s或在手掌振打200次 4.取含菌液体1、0mL,以琼脂灌注法接种平皿、每个样本接种2个平皿 于，35 37,培养箱中培养、24。48，h后计数.5 必须将本次检测所用的稀释液。棉拭子 培养基等留样作阴性比照 6.具体事项遵照卫生部，消毒技术规范、执行,7。对于适用接触皿采样的表面,以无菌操作方式。先将培养基注入硬质或软质Φ55平皿、使培养基表面高出培养皿周边，测试时 将培养皿倒过来 使培养基表面均匀牢固地按压住整个区域5s、不得有环形或线性的运动，8.对于围护结构.每面结构应用不少于4个培养皿按压。对于设备，每件用不少于2个培养皿按压。9，按压取样后的培养皿、应在2h之内 于.35。37、培养箱中培养、24 48，h后计数,10、菌数平均数取到小数点后1位、