E、8，悬浮微生物的检测E，8。1，悬浮微生物的采样装置有以下两类。1,采用无源采样装置 如培养皿 2.采用有源采样装置 如撞击采样器.离心采样器、过滤采样器,E.8.2，空气洁净环境中悬浮微生物的静态或空态检测前,应对各类表面进行擦拭消毒，但不得对室内空气进行熏蒸。喷洒之类的消毒.动态检测均不得对表面和空气进行消毒,E，8、3，沉降菌检测应符合下列要求，1。使用直径90mm.Φ90、的培养皿采样,当采用其他直径培养皿时，应使其总面积和Φ90皿总面积相当。2 培养皿中灌注胰蛋白酶大豆琼脂培养基、必须留样作阴性对照.3。培养皿表面应经适当消毒清洁处理后 布置在有代表性的地点和气流扰动极小的地点、在乱流洁净室内培养皿不应布置在送风口正下方.4，当用户没有特定要求时,培养皿应布置在地面及其以上0。8m之内的任意高度,5 每一间洁净室或每一个控制区应设1个阴性对照皿，6。动态监测时也可协商布点位置和高度，7，培养皿数应不少于微粒计数浓度的测点数 如工艺无特殊要求应大于等于表E、8。3中的最少培养皿数,另外各加1个对照皿,8、当延长沉降时间时.可按比例减少最少培养皿数.为防止脱水,最长沉降时间不宜超过1h、当所需沉降时间超过1h 可重叠多皿连续采样,除非经过验证 证明更长的沉降时间可以基本按比例增加菌落数.9,培养皿应从内向外布置 从外向内收皿。10、每布置完1个皿、皿盖只允许斜放在皿边上,对照皿盖挪开即盖上.11，布皿前和收皿后、均应用双层包装保护培养皿、以防污染.12 收皿后皿应倒置摆放,并应及时放入培养箱培养。在培养箱外时间不宜超过2h 如无专业标准规定，对于检测细菌总数，培养温度采用,35,37 培养时间为.24,48、h，对于检测真菌。培养温度。27,29 培养时间3d,13。布皿和收皿的检测人员必须穿无菌服、但不得穿大褂.头，手均不得裸露.裤管应塞在袜套内。并不得穿拖鞋。14、对培养后的皿上菌落计数时、应采用5.10倍放大镜查看。若有2个或更多的菌落重叠、可分辨时则以2个或多个菌落计数.15,当单皿菌落数太大受到质疑时.可按以下原则之一进行处理.1,作为坏点剔除.2。重测.如结果仍大、以两次平均值为准。如结果很小、可再重测,3,重测该处微粒浓度 参考此结果作出判断,所有上述处理方法均应记录在案。16、每皿平均菌落数取到小数点后1位，17.动态监测时每点叠放多个平皿或采用可自动切换的仪器 每点应采满4h以上.每皿可采30min。当只放1个皿时，可少于4h 但不可少于1h,E.8.4,浮游菌采样应符合下列要求、1、使用单级或多级撞击式采样器、离心采样器或过滤采样器.采样必须按所用仪器说明书的步骤进行、特别要注意检测之前对仪器消毒火菌。并对培养皿或培养基条做阴性对照,2 采样点数应不少于微粒计数浓度测点数,3 采样点应在离地0,8m高平面上均匀布置.或经委托方 用户，与检测方协商确定，乱流洁净室内不得在送风口正下方布点 静态或空态检测前对室内各种表面应作擦拭消毒,4.每点采样1次，如工艺无特殊要求.每次采样量应大于等于表E。8 4推荐的浮游菌最小采样量 每次采样时间不宜超过15min。不应超过30min,当洁净度很高。或预期含菌浓度可能很低时,采样量应大于最小采样量很多，以满足减少计数误差的要求、5.采样器应用支架固定，采样时检测人员应退出.手持离心式采样器除外 检测人员的穿戴同本附录E,8、3条第15款,必须手持采样器时.应将手臂伸直。站于下风向。6 采样后宜在2h之内将采样器中的培养皿或培养基条送入培养箱中培养 7,每点平均值取到小数点后1位,8 动态监测的测点位置，数量和高度由工艺并经协商确定 每间洁净室或每一个独立受控环境中各点总采样量,不分级别。均应大于1m3、每点可用多台采样器，9 单点菌落数太大时.应按附录E,8,3条第15款的原则处理 E 8、5，表面染菌密度检测应符合下列要求.1，对于洁净室内围护结构,设备等表面的微生物采样.应采用无菌棉拭子擦抹法。当表面很大.硬且平时，也可采用接触皿法.2.用规格板标定出面积为25cm2的区块、对于围护结构.每面结构不少于4块，对于设备，每件不少于2块 取样地点均协商确定。3，将无菌棉拭于含10mL稀释液试管中浸湿.于管壁上挤干后,对一区块擦抹采样、横竖往返8次 每一区块使用1根无菌棉拭 采样后,以无菌操作方式将棉拭采样端剪入原稀释液试管中。经电动混匀器震荡20s或在手掌振打200次、4.取含菌液体1。0mL、以琼脂灌注法接种平皿 每个样本接种2个平皿，于 35。37 培养箱中培养。24,48.h后计数 5、必须将本次检测所用的稀释液。棉拭子、培养基等留样作阴性比照.6.具体事项遵照卫生部、消毒技术规范。执行，7、对于适用接触皿采样的表面，以无菌操作方式,先将培养基注入硬质或软质Φ55平皿,使培养基表面高出培养皿周边。测试时.将培养皿倒过来，使培养基表面均匀牢固地按压住整个区域5s、不得有环形或线性的运动,8 对于围护结构.每面结构应用不少于4个培养皿按压，对于设备,每件用不少于2个培养皿按压。9,按压取样后的培养皿,应在2h之内、于，35。37.培养箱中培养，24.48。h后计数。10。菌数平均数取到小数点后1位，