E 8,悬浮微生物的检测E、8、1.悬浮微生物的采样装置有以下两类,1、采用无源采样装置.如培养皿、2。采用有源采样装置,如撞击采样器.离心采样器 过滤采样器 E,8，2、空气洁净环境中悬浮微生物的静态或空态检测前 应对各类表面进行擦拭消毒、但不得对室内空气进行熏蒸,喷洒之类的消毒、动态检测均不得对表面和空气进行消毒 E.8、3.沉降菌检测应符合下列要求、1。使用直径90mm、Φ90。的培养皿采样,当采用其他直径培养皿时.应使其总面积和Φ90皿总面积相当.2 培养皿中灌注胰蛋白酶大豆琼脂培养基.必须留样作阴性对照。3，培养皿表面应经适当消毒清洁处理后,布置在有代表性的地点和气流扰动极小的地点，在乱流洁净室内培养皿不应布置在送风口正下方、4,当用户没有特定要求时，培养皿应布置在地面及其以上0,8m之内的任意高度.5,每一间洁净室或每一个控制区应设1个阴性对照皿，6.动态监测时也可协商布点位置和高度、7。培养皿数应不少于微粒计数浓度的测点数。如工艺无特殊要求应大于等于表E 8,3中的最少培养皿数。另外各加1个对照皿，8.当延长沉降时间时.可按比例减少最少培养皿数 为防止脱水，最长沉降时间不宜超过1h,当所需沉降时间超过1h,可重叠多皿连续采样、除非经过验证、证明更长的沉降时间可以基本按比例增加菌落数 9，培养皿应从内向外布置.从外向内收皿.10.每布置完1个皿.皿盖只允许斜放在皿边上。对照皿盖挪开即盖上、11.布皿前和收皿后，均应用双层包装保护培养皿，以防污染,12、收皿后皿应倒置摆放、并应及时放入培养箱培养、在培养箱外时间不宜超过2h，如无专业标准规定，对于检测细菌总数，培养温度采用,35,37 培养时间为，24。48 h，对于检测真菌。培养温度，27 29。培养时间3d 13,布皿和收皿的检测人员必须穿无菌服。但不得穿大褂 头。手均不得裸露，裤管应塞在袜套内、并不得穿拖鞋 14.对培养后的皿上菌落计数时、应采用5 10倍放大镜查看，若有2个或更多的菌落重叠.可分辨时则以2个或多个菌落计数.15.当单皿菌落数太大受到质疑时.可按以下原则之一进行处理,1.作为坏点剔除 2 重测.如结果仍大 以两次平均值为准、如结果很小 可再重测、3 重测该处微粒浓度，参考此结果作出判断,所有上述处理方法均应记录在案.16。每皿平均菌落数取到小数点后1位，17。动态监测时每点叠放多个平皿或采用可自动切换的仪器，每点应采满4h以上.每皿可采30min、当只放1个皿时。可少于4h。但不可少于1h。E.8。4,浮游菌采样应符合下列要求，1 使用单级或多级撞击式采样器.离心采样器或过滤采样器。采样必须按所用仪器说明书的步骤进行.特别要注意检测之前对仪器消毒火菌，并对培养皿或培养基条做阴性对照 2、采样点数应不少于微粒计数浓度测点数，3，采样点应在离地0.8m高平面上均匀布置，或经委托方,用户.与检测方协商确定 乱流洁净室内不得在送风口正下方布点，静态或空态检测前对室内各种表面应作擦拭消毒，4,每点采样1次，如工艺无特殊要求,每次采样量应大于等于表E.8。4推荐的浮游菌最小采样量，每次采样时间不宜超过15min，不应超过30min.当洁净度很高,或预期含菌浓度可能很低时,采样量应大于最小采样量很多 以满足减少计数误差的要求。5，采样器应用支架固定、采样时检测人员应退出,手持离心式采样器除外、检测人员的穿戴同本附录E 8。3条第15款,必须手持采样器时,应将手臂伸直.站于下风向。6，采样后宜在2h之内将采样器中的培养皿或培养基条送入培养箱中培养.7。每点平均值取到小数点后1位。8、动态监测的测点位置 数量和高度由工艺并经协商确定 每间洁净室或每一个独立受控环境中各点总采样量。不分级别 均应大于1m3、每点可用多台采样器 9、单点菌落数太大时,应按附录E,8。3条第15款的原则处理，E,8.5。表面染菌密度检测应符合下列要求、1，对于洁净室内围护结构，设备等表面的微生物采样 应采用无菌棉拭子擦抹法，当表面很大 硬且平时.也可采用接触皿法，2、用规格板标定出面积为25cm2的区块,对于围护结构，每面结构不少于4块 对于设备。每件不少于2块 取样地点均协商确定 3 将无菌棉拭于含10mL稀释液试管中浸湿.于管壁上挤干后。对一区块擦抹采样,横竖往返8次.每一区块使用1根无菌棉拭，采样后、以无菌操作方式将棉拭采样端剪入原稀释液试管中、经电动混匀器震荡20s或在手掌振打200次,4,取含菌液体1。0mL、以琼脂灌注法接种平皿、每个样本接种2个平皿 于，35，37,培养箱中培养，24 48 h后计数、5,必须将本次检测所用的稀释液.棉拭子 培养基等留样作阴性比照，6,具体事项遵照卫生部，消毒技术规范,执行,7.对于适用接触皿采样的表面 以无菌操作方式、先将培养基注入硬质或软质Φ55平皿、使培养基表面高出培养皿周边。测试时。将培养皿倒过来.使培养基表面均匀牢固地按压住整个区域5s,不得有环形或线性的运动,8,对于围护结构、每面结构应用不少于4个培养皿按压 对于设备.每件用不少于2个培养皿按压。9、按压取样后的培养皿。应在2h之内,于 35，37。培养箱中培养、24。48.h后计数，10,菌数平均数取到小数点后1位,