E 8,悬浮微生物的检测E、8,1，悬浮微生物的采样装置有以下两类。1、采用无源采样装置，如培养皿.2，采用有源采样装置 如撞击采样器.离心采样器 过滤采样器 E.8.2，空气洁净环境中悬浮微生物的静态或空态检测前、应对各类表面进行擦拭消毒 但不得对室内空气进行熏蒸，喷洒之类的消毒.动态检测均不得对表面和空气进行消毒、E,8,3,沉降菌检测应符合下列要求,1,使用直径90mm。Φ90。的培养皿采样 当采用其他直径培养皿时,应使其总面积和Φ90皿总面积相当、2、培养皿中灌注胰蛋白酶大豆琼脂培养基.必须留样作阴性对照，3.培养皿表面应经适当消毒清洁处理后、布置在有代表性的地点和气流扰动极小的地点,在乱流洁净室内培养皿不应布置在送风口正下方，4、当用户没有特定要求时,培养皿应布置在地面及其以上0,8m之内的任意高度、5。每一间洁净室或每一个控制区应设1个阴性对照皿 6、动态监测时也可协商布点位置和高度,7，培养皿数应不少于微粒计数浓度的测点数。如工艺无特殊要求应大于等于表E 8.3中的最少培养皿数，另外各加1个对照皿。8。当延长沉降时间时。可按比例减少最少培养皿数。为防止脱水 最长沉降时间不宜超过1h.当所需沉降时间超过1h 可重叠多皿连续采样，除非经过验证。证明更长的沉降时间可以基本按比例增加菌落数.9,培养皿应从内向外布置、从外向内收皿，10。每布置完1个皿 皿盖只允许斜放在皿边上。对照皿盖挪开即盖上.11 布皿前和收皿后、均应用双层包装保护培养皿。以防污染，12。收皿后皿应倒置摆放，并应及时放入培养箱培养，在培养箱外时间不宜超过2h,如无专业标准规定、对于检测细菌总数。培养温度采用，35 37.培养时间为,24。48。h、对于检测真菌，培养温度.27。29。培养时间3d.13。布皿和收皿的检测人员必须穿无菌服。但不得穿大褂 头.手均不得裸露.裤管应塞在袜套内,并不得穿拖鞋 14 对培养后的皿上菌落计数时.应采用5 10倍放大镜查看、若有2个或更多的菌落重叠 可分辨时则以2个或多个菌落计数。15。当单皿菌落数太大受到质疑时，可按以下原则之一进行处理 1 作为坏点剔除、2 重测,如结果仍大。以两次平均值为准，如结果很小.可再重测，3.重测该处微粒浓度，参考此结果作出判断、所有上述处理方法均应记录在案，16、每皿平均菌落数取到小数点后1位、17。动态监测时每点叠放多个平皿或采用可自动切换的仪器 每点应采满4h以上。每皿可采30min。当只放1个皿时.可少于4h,但不可少于1h，E、8 4，浮游菌采样应符合下列要求,1、使用单级或多级撞击式采样器.离心采样器或过滤采样器，采样必须按所用仪器说明书的步骤进行。特别要注意检测之前对仪器消毒火菌.并对培养皿或培养基条做阴性对照、2,采样点数应不少于微粒计数浓度测点数 3、采样点应在离地0，8m高平面上均匀布置、或经委托方，用户。与检测方协商确定，乱流洁净室内不得在送风口正下方布点、静态或空态检测前对室内各种表面应作擦拭消毒.4.每点采样1次 如工艺无特殊要求,每次采样量应大于等于表E。8.4推荐的浮游菌最小采样量。每次采样时间不宜超过15min 不应超过30min.当洁净度很高、或预期含菌浓度可能很低时、采样量应大于最小采样量很多 以满足减少计数误差的要求.5。采样器应用支架固定，采样时检测人员应退出。手持离心式采样器除外 检测人员的穿戴同本附录E，8,3条第15款，必须手持采样器时 应将手臂伸直,站于下风向。6,采样后宜在2h之内将采样器中的培养皿或培养基条送入培养箱中培养、7、每点平均值取到小数点后1位.8,动态监测的测点位置。数量和高度由工艺并经协商确定.每间洁净室或每一个独立受控环境中各点总采样量.不分级别,均应大于1m3 每点可用多台采样器、9，单点菌落数太大时 应按附录E、8、3条第15款的原则处理。E.8.5.表面染菌密度检测应符合下列要求 1，对于洁净室内围护结构 设备等表面的微生物采样、应采用无菌棉拭子擦抹法.当表面很大.硬且平时。也可采用接触皿法。2 用规格板标定出面积为25cm2的区块 对于围护结构,每面结构不少于4块 对于设备 每件不少于2块.取样地点均协商确定。3 将无菌棉拭于含10mL稀释液试管中浸湿。于管壁上挤干后.对一区块擦抹采样 横竖往返8次。每一区块使用1根无菌棉拭.采样后,以无菌操作方式将棉拭采样端剪入原稀释液试管中。经电动混匀器震荡20s或在手掌振打200次、4 取含菌液体1、0mL 以琼脂灌注法接种平皿.每个样本接种2个平皿.于,35。37.培养箱中培养 24。48。h后计数 5,必须将本次检测所用的稀释液 棉拭子,培养基等留样作阴性比照,6、具体事项遵照卫生部,消毒技术规范.执行.7 对于适用接触皿采样的表面,以无菌操作方式 先将培养基注入硬质或软质Φ55平皿 使培养基表面高出培养皿周边.测试时 将培养皿倒过来，使培养基表面均匀牢固地按压住整个区域5s、不得有环形或线性的运动.8，对于围护结构,每面结构应用不少于4个培养皿按压、对于设备。每件用不少于2个培养皿按压,9、按压取样后的培养皿、应在2h之内、于、35、37、培养箱中培养、24.48,h后计数.10，菌数平均数取到小数点后1位，