附录A,规范性附录,细菌定量杀灭试验A。1，试验原理,将规定浓度的细菌悬液以一定比例与酸性电解水混合。作用至规定的时间后加入中和剂.终止酸性电解水的杀菌活性 进行活菌计数.然后与阳性对照组细菌悬液中的菌落数进行比较,以确定其杀菌效果.A,2，悬液定量杀菌试验A,2。1 菌悬液的制备A.2，1.1,按、消毒技术规范，2002年版.要求将细菌繁殖体和枯草杆菌黑色变种芽孢制成2,109CFU，mL。9，109CFU.mL的试验用菌悬液.A.2，1、2、按.消毒技术规范、2002年版.要求将白色念珠菌制成2,108CFU.mL，9,108CFU，mL的试验用菌悬液。A 2.2,悬液定量杀菌试验操作程序A。2。2，1,开启生成器.待产生的酸性电解水中有效成分处于稳定状态时.用250mL磨口锥形瓶接取满瓶后，盖好瓶盖.置20，1、水浴备用.A.2。2,2 取消毒试验用无菌大试管、先加入0,05mL试验用菌液，再加入0,05mL有机干扰物质.混匀 置20。1 水浴中5min后。用无菌吸管吸取酸性电解水9.9mL注入其中、迅速混匀并立即计时,A 2.2、3，待试验菌与消毒剂相互作用至各预定时间.分别吸取0,5mL试验菌与酸性电解水的混合液加于含4 5mL中和剂,0 1 硫代硫酸钠，0 1 吐温80的生理盐水,的试管中,混匀，作用10min后 分别吸取1。0mL样液,按活菌培养计数方法测定存活菌数 每管样液接种2个平皿，如平板上生长的菌落数较多时.可进行系列10倍稀释后。再进行活菌培养计数，A 2 2,4。同时用标准硬水代替酸性电解水 进行平行试验，作为阳性对照。A，2 2.5，所有试验样本均在37,温箱中培养、对细菌繁殖体培养48h观察最终结果。对细菌芽孢和白色念珠菌需培养72h观察最终结果,A，2。2,6 试验重复3次 包括对照.计算各组的活菌浓度，CFU,mL，并换算为对数值、N 然后按式 A,1.计算杀灭对数值、A.2，3。杀灭对数值的计算，计算各组的活菌浓度.CFU.mL,并换算为对数值、N,然后按式，A、1,计算杀灭对数值,KL。N0、Nx,A、1.式中。KL.杀灭对数值、N0，对照组平均活菌浓度的对数值、Nx，试验组活菌浓度对数值、计算杀灭对数值时，取小数点后两位值 可以进行数字修约、但是，如果消毒试验组消毒处理后平均生长菌落数小于1CFU,杀灭对数值即大于或等于对照组平均活菌浓度的对数值，KL,lg、N0,A,2,4、评价规定。取酸性电解水原液与3个作用时间、重复试验3次，在最短作用时间，以及最短作用时间的1，5倍时 对大肠杆菌，金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌，枯草杆菌黑色变种芽孢。各次试验的杀灭对数值均 5.00.对白色念珠菌。各次试验的杀灭对数值均。4、00,判定为消毒合格,A,2、5 注意事项A.2,5、1。试验中所使用的中和剂。稀释液和培养基等,各批次均应进行无菌检查,发现有菌生长.则全部试验需换用未污染试剂或培养基重做。A,2,5、2。进行细菌液定量杀菌试验时，对用于清洗物品的消毒或用于冲洗浸泡消毒 有机干扰物质采用0、3,3g。L，牛血清白蛋白。对未清洗的物品或有机物较多的物品的消毒，有机干扰物采用3。30g。L 牛血清白蛋白,