附录A，规范性附录。细菌定量杀灭试验A。1,试验原理,将规定浓度的细菌悬液以一定比例与酸性电解水混合。作用至规定的时间后加入中和剂.终止酸性电解水的杀菌活性.进行活菌计数。然后与阳性对照组细菌悬液中的菌落数进行比较。以确定其杀菌效果.A 2、悬液定量杀菌试验A。2、1。菌悬液的制备A，2。1 1，按,消毒技术规范 2002年版,要求将细菌繁殖体和枯草杆菌黑色变种芽孢制成2，109CFU、mL 9 109CFU。mL的试验用菌悬液.A.2,1，2 按,消毒技术规范 2002年版，要求将白色念珠菌制成2 108CFU、mL。9 108CFU,mL的试验用菌悬液 A。2 2、悬液定量杀菌试验操作程序A，2 2。1，开启生成器，待产生的酸性电解水中有效成分处于稳定状态时,用250mL磨口锥形瓶接取满瓶后，盖好瓶盖。置20。1、水浴备用，A。2 2。2。取消毒试验用无菌大试管，先加入0，05mL试验用菌液,再加入0.05mL有机干扰物质,混匀。置20,1.水浴中5min后。用无菌吸管吸取酸性电解水9。9mL注入其中，迅速混匀并立即计时、A 2 2。3,待试验菌与消毒剂相互作用至各预定时间、分别吸取0,5mL试验菌与酸性电解水的混合液加于含4.5mL中和剂，0,1.硫代硫酸钠、0,1.吐温80的生理盐水、的试管中,混匀.作用10min后。分别吸取1，0mL样液。按活菌培养计数方法测定存活菌数,每管样液接种2个平皿，如平板上生长的菌落数较多时,可进行系列10倍稀释后.再进行活菌培养计数.A 2.2、4.同时用标准硬水代替酸性电解水。进行平行试验。作为阳性对照 A。2,2，5，所有试验样本均在37。温箱中培养 对细菌繁殖体培养48h观察最终结果.对细菌芽孢和白色念珠菌需培养72h观察最终结果、A,2，2 6,试验重复3次、包括对照、计算各组的活菌浓度 CFU mL，并换算为对数值,N.然后按式，A、1,计算杀灭对数值，A。2 3，杀灭对数值的计算、计算各组的活菌浓度。CFU,mL，并换算为对数值 N,然后按式、A.1，计算杀灭对数值,KL。N0。Nx、A.1.式中、KL,杀灭对数值.N0，对照组平均活菌浓度的对数值 Nx、试验组活菌浓度对数值、计算杀灭对数值时 取小数点后两位值、可以进行数字修约，但是，如果消毒试验组消毒处理后平均生长菌落数小于1CFU、杀灭对数值即大于或等于对照组平均活菌浓度的对数值 KL。lg,N0、A,2，4 评价规定。取酸性电解水原液与3个作用时间，重复试验3次、在最短作用时间、以及最短作用时间的1，5倍时 对大肠杆菌。金黄色葡萄球菌。铜绿假单胞菌。枯草杆菌黑色变种芽孢、各次试验的杀灭对数值均、5,00。对白色念珠菌,各次试验的杀灭对数值均、4,00,判定为消毒合格、A 2,5、注意事项A 2。5。1 试验中所使用的中和剂，稀释液和培养基等，各批次均应进行无菌检查 发现有菌生长，则全部试验需换用未污染试剂或培养基重做。A，2。5、2 进行细菌液定量杀菌试验时。对用于清洗物品的消毒或用于冲洗浸泡消毒。有机干扰物质采用0,3。3g。L.牛血清白蛋白.对未清洗的物品或有机物较多的物品的消毒，有机干扰物采用3，30g。L 牛血清白蛋白。