附录A，规范性附录，细菌定量杀灭试验A，1 试验原理、将规定浓度的细菌悬液以一定比例与酸性电解水混合、作用至规定的时间后加入中和剂，终止酸性电解水的杀菌活性,进行活菌计数.然后与阳性对照组细菌悬液中的菌落数进行比较，以确定其杀菌效果、A 2 悬液定量杀菌试验A。2。1，菌悬液的制备A。2,1，1、按，消毒技术规范，2002年版、要求将细菌繁殖体和枯草杆菌黑色变种芽孢制成2、109CFU、mL.9，109CFU，mL的试验用菌悬液，A，2。1.2，按、消毒技术规范、2002年版，要求将白色念珠菌制成2 108CFU、mL。9。108CFU、mL的试验用菌悬液 A，2,2,悬液定量杀菌试验操作程序A 2，2，1。开启生成器、待产生的酸性电解水中有效成分处于稳定状态时、用250mL磨口锥形瓶接取满瓶后 盖好瓶盖、置20，1。水浴备用 A、2、2,2。取消毒试验用无菌大试管。先加入0,05mL试验用菌液、再加入0。05mL有机干扰物质,混匀,置20.1,水浴中5min后.用无菌吸管吸取酸性电解水9 9mL注入其中.迅速混匀并立即计时.A 2,2 3，待试验菌与消毒剂相互作用至各预定时间,分别吸取0.5mL试验菌与酸性电解水的混合液加于含4.5mL中和剂 0,1,硫代硫酸钠,0.1.吐温80的生理盐水。的试管中、混匀 作用10min后.分别吸取1、0mL样液、按活菌培养计数方法测定存活菌数,每管样液接种2个平皿.如平板上生长的菌落数较多时 可进行系列10倍稀释后 再进行活菌培养计数、A。2,2,4,同时用标准硬水代替酸性电解水，进行平行试验，作为阳性对照 A，2。2。5,所有试验样本均在37.温箱中培养，对细菌繁殖体培养48h观察最终结果、对细菌芽孢和白色念珠菌需培养72h观察最终结果 A,2。2。6,试验重复3次。包括对照 计算各组的活菌浓度,CFU、mL 并换算为对数值。N.然后按式.A、1,计算杀灭对数值，A,2 3。杀灭对数值的计算。计算各组的活菌浓度。CFU,mL.并换算为对数值.N，然后按式、A。1、计算杀灭对数值，KL。N0。Nx。A，1、式中 KL.杀灭对数值 N0。对照组平均活菌浓度的对数值 Nx、试验组活菌浓度对数值、计算杀灭对数值时。取小数点后两位值。可以进行数字修约。但是、如果消毒试验组消毒处理后平均生长菌落数小于1CFU、杀灭对数值即大于或等于对照组平均活菌浓度的对数值 KL,lg。N0、A。2,4，评价规定,取酸性电解水原液与3个作用时间，重复试验3次、在最短作用时间.以及最短作用时间的1.5倍时 对大肠杆菌，金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌。枯草杆菌黑色变种芽孢.各次试验的杀灭对数值均.5.00,对白色念珠菌,各次试验的杀灭对数值均、4 00.判定为消毒合格.A、2,5，注意事项A.2,5、1，试验中所使用的中和剂、稀释液和培养基等、各批次均应进行无菌检查 发现有菌生长。则全部试验需换用未污染试剂或培养基重做，A.2,5,2、进行细菌液定量杀菌试验时。对用于清洗物品的消毒或用于冲洗浸泡消毒。有机干扰物质采用0,3 3g。L，牛血清白蛋白，对未清洗的物品或有机物较多的物品的消毒、有机干扰物采用3，30g.L、牛血清白蛋白.