附录A、规范性附录、细菌定量杀灭试验A、1，试验原理.将规定浓度的细菌悬液以一定比例与酸性电解水混合，作用至规定的时间后加入中和剂.终止酸性电解水的杀菌活性,进行活菌计数 然后与阳性对照组细菌悬液中的菌落数进行比较，以确定其杀菌效果.A，2.悬液定量杀菌试验A,2，1,菌悬液的制备A、2、1、1.按 消毒技术规范 2002年版。要求将细菌繁殖体和枯草杆菌黑色变种芽孢制成2。109CFU,mL.9。109CFU mL的试验用菌悬液.A 2，1，2、按,消毒技术规范,2002年版.要求将白色念珠菌制成2，108CFU,mL,9、108CFU,mL的试验用菌悬液、A、2 2 悬液定量杀菌试验操作程序A,2。2 1.开启生成器 待产生的酸性电解水中有效成分处于稳定状态时，用250mL磨口锥形瓶接取满瓶后,盖好瓶盖.置20 1。水浴备用、A，2，2，2 取消毒试验用无菌大试管,先加入0、05mL试验用菌液，再加入0,05mL有机干扰物质 混匀,置20、1，水浴中5min后,用无菌吸管吸取酸性电解水9 9mL注入其中.迅速混匀并立即计时.A、2 2.3,待试验菌与消毒剂相互作用至各预定时间,分别吸取0，5mL试验菌与酸性电解水的混合液加于含4，5mL中和剂 0，1。硫代硫酸钠，0、1.吐温80的生理盐水，的试管中 混匀、作用10min后 分别吸取1。0mL样液,按活菌培养计数方法测定存活菌数,每管样液接种2个平皿、如平板上生长的菌落数较多时,可进行系列10倍稀释后、再进行活菌培养计数，A。2、2 4、同时用标准硬水代替酸性电解水，进行平行试验、作为阳性对照 A.2。2、5，所有试验样本均在37、温箱中培养。对细菌繁殖体培养48h观察最终结果。对细菌芽孢和白色念珠菌需培养72h观察最终结果.A,2 2，6.试验重复3次 包括对照。计算各组的活菌浓度、CFU，mL.并换算为对数值。N 然后按式.A、1、计算杀灭对数值.A 2、3。杀灭对数值的计算。计算各组的活菌浓度、CFU。mL.并换算为对数值、N.然后按式.A，1、计算杀灭对数值，KL、N0,Nx,A，1.式中.KL,杀灭对数值。N0。对照组平均活菌浓度的对数值，Nx 试验组活菌浓度对数值,计算杀灭对数值时.取小数点后两位值，可以进行数字修约，但是.如果消毒试验组消毒处理后平均生长菌落数小于1CFU，杀灭对数值即大于或等于对照组平均活菌浓度的对数值。KL,lg N0、A 2.4.评价规定 取酸性电解水原液与3个作用时间，重复试验3次，在最短作用时间，以及最短作用时间的1。5倍时 对大肠杆菌 金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌.枯草杆菌黑色变种芽孢。各次试验的杀灭对数值均.5，00,对白色念珠菌，各次试验的杀灭对数值均 4,00.判定为消毒合格。A、2。5。注意事项A。2。5 1,试验中所使用的中和剂。稀释液和培养基等,各批次均应进行无菌检查。发现有菌生长。则全部试验需换用未污染试剂或培养基重做 A、2 5，2.进行细菌液定量杀菌试验时.对用于清洗物品的消毒或用于冲洗浸泡消毒。有机干扰物质采用0。3.3g,L。牛血清白蛋白，对未清洗的物品或有机物较多的物品的消毒，有机干扰物采用3，30g。L、牛血清白蛋白