附录A，规范性附录 细菌定量杀灭试验A、1、试验原理、将规定浓度的细菌悬液以一定比例与酸性电解水混合、作用至规定的时间后加入中和剂。终止酸性电解水的杀菌活性,进行活菌计数，然后与阳性对照组细菌悬液中的菌落数进行比较，以确定其杀菌效果.A,2,悬液定量杀菌试验A,2、1.菌悬液的制备A，2,1 1.按,消毒技术规范，2002年版。要求将细菌繁殖体和枯草杆菌黑色变种芽孢制成2.109CFU，mL 9，109CFU.mL的试验用菌悬液。A 2.1 2 按。消毒技术规范。2002年版.要求将白色念珠菌制成2，108CFU,mL.9，108CFU。mL的试验用菌悬液，A、2.2，悬液定量杀菌试验操作程序A、2、2、1、开启生成器,待产生的酸性电解水中有效成分处于稳定状态时。用250mL磨口锥形瓶接取满瓶后。盖好瓶盖、置20、1。水浴备用,A、2,2，2 取消毒试验用无菌大试管。先加入0.05mL试验用菌液、再加入0.05mL有机干扰物质 混匀、置20,1、水浴中5min后、用无菌吸管吸取酸性电解水9。9mL注入其中,迅速混匀并立即计时，A，2，2。3.待试验菌与消毒剂相互作用至各预定时间.分别吸取0.5mL试验菌与酸性电解水的混合液加于含4。5mL中和剂.0,1、硫代硫酸钠 0,1.吐温80的生理盐水。的试管中。混匀。作用10min后,分别吸取1。0mL样液 按活菌培养计数方法测定存活菌数，每管样液接种2个平皿.如平板上生长的菌落数较多时.可进行系列10倍稀释后。再进行活菌培养计数、A.2。2、4、同时用标准硬水代替酸性电解水.进行平行试验 作为阳性对照 A.2 2、5、所有试验样本均在37。温箱中培养，对细菌繁殖体培养48h观察最终结果.对细菌芽孢和白色念珠菌需培养72h观察最终结果，A,2 2、6 试验重复3次.包括对照、计算各组的活菌浓度、CFU,mL、并换算为对数值，N、然后按式.A.1，计算杀灭对数值、A、2 3。杀灭对数值的计算.计算各组的活菌浓度,CFU，mL 并换算为对数值，N,然后按式,A 1，计算杀灭对数值,KL、N0，Nx A 1.式中、KL、杀灭对数值，N0 对照组平均活菌浓度的对数值、Nx、试验组活菌浓度对数值 计算杀灭对数值时 取小数点后两位值。可以进行数字修约 但是。如果消毒试验组消毒处理后平均生长菌落数小于1CFU 杀灭对数值即大于或等于对照组平均活菌浓度的对数值。KL。lg。N0,A,2 4,评价规定 取酸性电解水原液与3个作用时间，重复试验3次,在最短作用时间。以及最短作用时间的1，5倍时、对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌，枯草杆菌黑色变种芽孢.各次试验的杀灭对数值均。5。00，对白色念珠菌 各次试验的杀灭对数值均,4 00.判定为消毒合格，A 2,5.注意事项A.2。5,1 试验中所使用的中和剂,稀释液和培养基等,各批次均应进行无菌检查、发现有菌生长.则全部试验需换用未污染试剂或培养基重做,A 2、5.2 进行细菌液定量杀菌试验时 对用于清洗物品的消毒或用于冲洗浸泡消毒。有机干扰物质采用0.3.3g L,牛血清白蛋白,对未清洗的物品或有机物较多的物品的消毒,有机干扰物采用3.30g。L 牛血清白蛋白、